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产品展示

CD50,细胞间粘附分子-3抗体

CD50,细胞间粘附分子-3抗体

价格:电议 型号:

原产地:美洲发布时间:2015/5/5更新日期:2019/11/8

CD50,细胞间粘附分子-3抗体类似于免疫印迹法,在膜上检测目标蛋白;但是斑点印迹法中检测的蛋白质不用电泳进行分离。取而代之的是,含有目标蛋白的样品被直接“点”到膜上。这不是一种定量的方法,但它可以直接检测某种特定蛋白的有无; 例如,斑点印迹法可用于检测蔗糖梯度分离的细胞裂解产物中的某些蛋白质定位。

采购度:517

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详细内容

               产品资料

CD50,细胞间粘附分子-3抗体具体参数特点

产品类型:二抗

产品规格:0.2ml/0.1ml

产品产地:美国

产品应用:科研

产品商标:Abcam

产品价格:优惠价格来电咨询

抗体来源:详询种属

适应物种:可提供抗体的各种标记

使用范围:仅限科研使用,不使用与临床

详细资料:参考产品详询说明
储存方式

CD50,细胞间粘附分子-3抗体特殊抗体的保存条件:

· 酶联抗体:永远保存在4℃,避免冻起来。否则会导致酶活性的下降或者丧失

· 偶联抗体:所有偶联抗体都是在棕色管中或使用锡箔纸避光保存。尤其是荧光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!

· IgG3的同型对照:永远保存在4℃,避免冻起来。因为如果出现冻融过程,该抗体非常容易形成多聚体

无论是保存还是运输,绝对避免反复冻融!

 

反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!

操作流程

CD50,细胞间粘附分子-3抗体免疫吸附实验检测抗体操作方法

酶联免疫吸附试验(ELISA)用来对一个特定的可溶性蛋白分子进行定性和定量分析,如血清中的特异性抗体或蛋白质的有无及浓度。此方法是利用了聚苯乙烯检测板吸附蛋白质或抗体的能力及抗体特异性结合靶抗原的能力。一般来说,此方法可通过检测实验样品在一定波长下的吸光度,再结合已知的抗原或抗体浓度标准曲线,计算出检测样品中此抗原或抗体的浓度。有常用的ELISA检测方法。

 . 免疫印迹法

免疫印迹法

是一种通过凝胶电泳分离蛋白质并通过电转移把蛋白质转移到吸附膜上。一经蛋白印迹后,即可通过特异性的标记抗体检测到相应蛋白质。

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)可用以检测已被SDS化学变性的蛋白。然而,某些特定的抗体不会再一个变性的蛋白质分子上识别其抗原表位,因此需要进行不含SDS的聚丙烯酰胺凝胶电泳。

蛋白印迹可以通过湿法或半干法进行。在前者,凝胶夹在印迹膜和各种过滤装置中间,然后把整个装置埋进一个装满三甘氨酸转移缓冲的电极槽中。在后者,夹在中间的凝胶周围只有少量的缓冲,然后封闭在电极板之间。虽然半干法转膜较快,但需要很好地拟合各部分的夹层配件,而湿法转膜很少会出现问题,可以尽量保持重复实验结果的一致性。此外,如果半干法转膜时间过长,较小分子量的蛋白质可能会从膜上转过。

转膜后,需对膜进行封闭,以减少非特异性蛋白结合,然后进行用一抗孵育膜,以研究感兴趣的目标蛋白。单克隆抗体通常具有更高的特异性;然而许多单克隆抗体产生于某个特定肽段而不是一个天然蛋白质,因此可能无法检测到PAGE所分离的天然蛋白。也可使用多克隆抗体,但易形成较高的背景值。因一抗通常无标记,所以需要一个可以结合在一抗Fc段的标记的二抗,以用于*后的检测。通常会用酶来标记二抗。酶标记后的印迹可通过化学发光酶底物及放射自显影技术成像。被抗体检测和标记到的蛋白质会出现在图像的暗区。

斑点印迹法

 

类似于免疫印迹法,在膜上检测目标蛋白;但是斑点印迹法中检测的蛋白质不用电泳进行分离。取而代之的是,含有目标蛋白的样品被直接到膜上。这不是一种定量的方法,但它可以直接检测某种特定蛋白的有无例如,斑点印迹法可用于检测蔗糖梯度分离的细胞裂解产物中的某些蛋白质定位。

注意事项

抗体分类

抗体分类:根据重链恒定区的血清学类型,可将抗体分为IgM,IgG,IgA,IgD,IgE五类,它们的重链分别为mu, gamma, alpha, delta, epsilon链。在上述每一类别中,按重链构造上的变异又可分为几个亚类,例如人的IgG可分为IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四个亚类。

轻链分为两种类型,kappa链和lambda链,但每种抗体中只存在一种类型的轻链。

二抗:二抗是在其它宿主体内制备的能与一抗或一抗片段结合的抗体,上面通常连有酶或荧光素等标签。由于二抗所具备的优点使得其在免疫学实验中得以应用广泛,如western blot(通过与特异性抗体结合来鉴定蛋白质),ELISA(以耦联有酶的抗体或抗原为标记来检测特异性的蛋白质,尤其是相应的抗原或抗体),免疫组织化学(检测组织中的特异性抗原),免疫细胞化学(通过免疫学方法检测细胞的抗原组成),流式细胞术(通过检测激光所激发荧光来鉴定分离不同类型的细胞)及免疫沉淀(通过抗原与抗体的特异性结合作用来分离相应抗原)。二抗针对某一特定物种(如小鼠)的所有抗体均具有特异性,因而使用标记的二抗可以免去对每一个一抗进行标记,大大节省了时间和费用;此外,一个一抗分子可以同时结合几个二抗分子,从而使信号大大增强,提高了实验灵敏度。

 

二抗可以耦联有几种不同的标记,可以是酶,荧光素,或生物素。

产品特点

详细抗体简介

抗体:是高等动物在抗原物质的刺激下由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。抗体通常存在于血清和淋巴(组织液)中。

单克隆及多克隆抗体:由单一克隆的细胞(通常是单一克隆的杂交瘤细胞)所产生的识别某一抗原表位的单一抗体;多克隆抗体是由多种细胞分别接触相应抗原而产生的多种抗体的总和,多克隆抗体识别抗原的多个表位。

抗体结构:抗体是由四条肽链构成的“Y”形对称的分子,包括两条重链和两条轻链。在“Y”的尖端部位的氨基酸顺序在不同的抗体分子中差别很大,是负责与抗原进行特异性结合的区域,称为可变区,余下的区域则称为恒定区。


 

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